PURIFIKASI ANTIBODI POLIKLONAL BINDER OF SPERM (BSP-1) MENGGUNAKAN AMONIUM SULFAT 25% DAN 50%

Sri, Herlianti (2022) PURIFIKASI ANTIBODI POLIKLONAL BINDER OF SPERM (BSP-1) MENGGUNAKAN AMONIUM SULFAT 25% DAN 50%. S1 thesis, Universitas Mataram.

Text FIX SKRIPSI SRI HERLIANTI B1D018262.pdf Restricted to Repository staff only Download (1MB)

Abstract

Penelitian ini bertujuan untuk memurnikan antibodi poliklonal BSP-1 menggunakan amonium sulfat 25% dan 50% serta menganalisis profilnya menggunakan SDS PAGE. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi, Fakultas Peternakan Universitas Mataram mulai 14 Oktober sampai 21 Desember 2021. Materi yang digunakan yaitu serum kelinci pasca vaksinasi booster kedua menggunakan vaksin peptida sintetik BSP- 1. Adapun metode pada penelitian ini yaitu dengan melakukan vaksinasi pada kelinci menggunakan vaksin Peptida sintetik BSP-1, kemudian dilakukan pengambilan darah dan pemisahan serum. Setelah itu dilakukan pemurnian antibodi dengan menambahkan amonium sulfat hingga konsentrasi akhir 25% dan 50% ke dalam larutan sampel. Selanjutnya dilakukan dialisis menggunakan Phosphate Buffered Saline (PBS) untuk membersihkan Garam amonium sulfat yang terdapat pada sampel. Untuk melihat profil antibodi di dalam sampel dilakukan analisis menggunakan SDS PAGE 12,5%. Pada penelitian ini, analisa data lebih bersifat analisa semi kuantitatif deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemurnian menggunakan amonium sulfat 50% konsentrasi protein 2 mg/ml menghasilkan endapan protein lebih banyak dibandingkan amonium sulfat 25% dengan konsentrasi protein 1 mg/ml. Hasil panen antibodi BSP-1 amonium sulfat konsentrasi 25% sebanyak 125 μl sedangkan hasil panen antibodi BSP-1 amonium sulfat konsentrasi 50% sebanyak 325 μl. Berdasarkan hasil analisis kedua gel menggunakan SDS PAGE jumlah pita yang terekspresi sebelum dilakukan pemurnian sebanyak 4 pita (ulangan 1) dan 9 pita (ulangan 2). Setelah dilakukan pemurnian menggunakan amonium sulfat 25% dan 50%, pita yang terekspresi menjadi 3 pita pada ulangan 1 dan 8 pita pada ulangan 2. Hasil analisis kedua gel menggunakan SDS PAGE diperoleh protein yang mirip dengan IgG dengan berat molekul 164,3 kDa terdapat pada penambahan amonium sulfat 25% dan 50%. Hal ini menunjukkan bahwa komponen protein pada sampel antibodi poliklonal BSP-1 dapat dimurnikan menggunakan amonium sulfat 25% dan 50% serta berat molekulnya dapat dikarakterisasi menggunakan SDS PAGE. Pada penelitian ini purifikasi menggunakan amonium sulfat 50% memberi hasil lebih baik daripada amonium sulfat 25%.

Item Type:	Thesis (S1)
Keywords (Kata Kunci):	urifikasi, Antibodi Poliklonal, BSP-1, Bradford, Amonium Sulfat, Berat Molekul, SDS PAGE
Subjects:	S Agriculture > S Agriculture (General)
Divisions:	Fakultas Peternakan
Depositing User:	Meike Megawati
Date Deposited:	31 Aug 2022 23:59
Last Modified:	31 Aug 2022 23:59
URI:	http://eprints.unram.ac.id/id/eprint/31360

Actions (login required)

View Item